细胞的密度记录（细胞密度估计）

有谁知道单个生物细胞的密度是多少?生理盐水的折射率是多少?谢谢_百度...

首先要知道 生理盐水是 0.9%NaCl的水溶液，正常人按60kg举例，需要NaCl 6g 所以大概需要生理盐水600ml；葡萄糖120g如果是其他的溶液也可以计算得出。

物理性质 密度162 熔点80.2℃，沸点219℃，闪点789℃，折射率58212（100℃）不溶于水，溶于乙醇和乙醚等 易挥发，易升华 用途 广泛用作制备染料、树脂、溶剂等的原料，也用作驱虫剂（俗称卫生球或樟脑丸）。

第一个公式为稀释前后溶质质量相等，第二个公式为稀释前后溶质的量相等。其中，第一个公式中，ω1为稀释质量分数，ρ1为密度，V1为欲配溶液体积，ω2为浓溶液质量分数，ρ2为密度，V2为需用浓溶液体积；第二个公式中，C1为稀释前的浓度，V1为稀释前体积，C2为稀释后的浓度，V2为稀释后体积。

丙酮的折光率是： （n20D）3588。简介 丙酮是无色液体，具有令人愉快的气味（辛辣甜味）。易挥发。能与水、乙醇、N，N-二甲基甲酰胺、氯仿、乙醚及大多数油类混溶。相对密度 （d25）0.7845。熔点-97℃。沸点505℃。折光率 （n20D）3588。闪点-20℃。易燃。半数致死量（大鼠，经口）7ml/kg。有刺激性。

这是因为油镜的放大倍数较高，而透镜很小，光线通过不同密度的介质物体（玻片→空气→透镜）时，部分光线会发生折射而散失，进入镜筒的光线少，视野较暗，物体观察不清。如在透镜与玻片之间滴加和玻璃折射率（n=52）相仿的香柏油（n=515），则使进入油镜的光线增多，视野亮度增强，物象清晰。

相对密度3266（20/4℃） 水溶性 20 G/L （20 C） 自燃点640℃。 粘度（20℃）0.43mPa·s。 折射率nD（20℃）4244。 临界温度237℃， 临界压力0795MPa。 溶解性 溶于约50倍的水，溶于酚、醛、酮、冰醋酸、磷酸三乙酯、乙酰乙酸乙酯、环己胺。

od600值怎么测中提要求

测量方法：将准备好的样品放入仪器的测量孔中，按照仪器的操作指南进行测量。通常，仪器会自动读取并显示光密度值。 记录结果：一旦得到测量结果，应记录下来。这就是所求的OD600值。需要注意的是，不同的微生物可能有不同的OD600参考值范围，因此要根据具体微生物种类来判断其生长状况或浓度。

要测量OD600值，首先，你需要准备一个空白的培养基作为对照，并确保分光光度计已调至零点。接下来，吸取待测菌液。如果菌液浓度不是特别浓，无需进行稀释，直接进行测量。如果菌液浓度过高，应将其稀释一倍，然后在600纳米波长处读取吸光度。最后，将读取的值乘以稀释的倍数，就得到了OD600值。

取空白培养基作为对照品将分光光度计调零，吸取菌液如果长得不浓就不要稀释，如果长得浓就稀释一倍，600nm处读取的值乘上稀释倍数就是od600。大肠杆菌浓度od600不需要太精确的，有的时候目测一下也就直接诱导了。

在操作过程中，需要注意的是，样品必须是均匀的溶液，无沉淀，且需进行细胞计数校正，以确保分光光度计的准确测量。如果使用了显色培养基，可能会出现负值读数。此外，样品应在悬浮状态下进行测试，OD600值的理想范围是0.1-5之间，过高的浓度需适当稀释以保证测量的线性关系。

细胞生长曲线方法

1、细胞生长曲线的测量方法主要包括两种，计数法和MTT法。首先，采用计数法进行步骤如下： 从生长良好的接近汇合的细胞中，使用胰酶进行消化，然后将细胞制成悬液并进行计数。对于非粘壁细胞，需要先离心去除旧培养基，再加入新鲜培养基以制备悬液。

2、实验原理指出，绘制细胞生长曲线采用的是计数法。首先，根据细胞接种的浓度和密度，确保细胞能在7至10天内充分生长而不抑制，且每次计数至少三个孔位取平均值，以减少误差。接着，通过连续对细胞进行计数，记录存活细胞数量与时间的关系，构建出生长曲线。

3、td=t×lg2除以（lgnt减lgn0）。td=t×lg2除以（lgnt减lgn0）公式是在1942年时由现代细胞生长动力学奠基人Monod提出的计算生长曲线的公式，并被载入生物学历史。细胞是生物体基本的结构和功能单位，已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，可以分为原核细胞和真核细胞。

4、t=T/A，A=log2Y/X。绘制细胞生长曲线，根据公式t=T/A，A=log2Y/X计算细胞倍增时间（t为细胞倍增时间，Y为细胞峰值前1d的细胞数，X为接种细胞数，T为细胞生长时间）计算即可。细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法，也是判定细胞活力的重要指标，是培养细胞生物学特性的基本参数之一。

5、．取生长良好接近汇合的细胞，用胰酶消化，用新培养基制成细胞悬液后计数（见细胞传代培养的实验步骤）。如是非粘壁细胞，则离心弃旧培养基后，换上一定量的新鲜培养基然后制成细胞悬液计数。2．根据细胞计数结果按每个小方瓶5×104/mL作传代培养接种细胞，共接种21瓶细胞。

6、．制备1 mL细胞悬液。空白对照以1 mL培养基代替细胞悬液。加入0．1 mL MTT于37℃孵育4 h。使MTT还原为蓝紫色甲月赞结晶。2．加1 mL DTW脱色液，37℃至少静置30 min（甚至过夜），使甲质颗粒充分溶解。

集落培养时细胞接种密度该怎么算?

1、如果是这样的话，先把母液稀释10000倍，细胞密度就是28X10^5。2X10^5/28X10^5=0.07752。从稀释液中取752微升，盐水补齐至300微升。平均分装到2个皿中。

2、根据细胞增殖能力，将细胞悬液倍比稀释。一般按照每皿含50、100、200个细胞的浓度分别接种5ml细胞悬液到培养皿（直径 60mm ）中，以十字方向轻轻晃动培养皿，使细胞分散均匀。（4）培养皿置 37℃ 、5%CO2中培养2~3周，中间根据培养液pH变化适时更换新鲜培养液。

3、接种密度控制在10~200个／ml。在计数准确，细胞活性正常的情况下，一般稀释为20个／ml，每孔接种200μl，这样每孔落人细胞数平均为1，获得单克隆生长孔的概率最大，数量最多。有些细胞的克隆化培养效果不理想的原因与它们在低密度下没有能力生存有关。

4、把平皿放置在倒置显微镜下，观察细胞克隆数。计算形成率。 软琼脂培养法常用检测肿瘤细胞和转化细胞系。试验中琼脂与细胞相混时，琼脂温度不宜超过40℃。接种细胞的密度每平方厘米不超过35个，一般6cm的平皿接种1000个细胞。正常细胞在悬浮状态下不能增殖，不适用于软琼脂克隆形成试验。

5、平板克隆适用于贴壁生长的细胞，首先，将细胞培养在固体培养基上，形成可见的细胞集落。操作步骤包括细胞制备、接种、培养和显微镜观察。注意事项涉及细胞悬液的均匀性和接种密度的控制。软琼脂克隆则适合研究悬浮生长的细胞，利用琼脂糖作为悬浮介质。

6、第三，细胞培养时血清浓度稍大一些。通常细胞培养血清浓度为10%-15%，但如果血清冻融次数过多，那营养物质丧失活性，按15%的浓度配制事实上达不到15%的营养成分，故培养基配置时一般用18%-20%的血清。

细胞计数一个大格的标准

1、计数室的刻度一般有两种规格，一种是一个大方格分成16个中方格，而每个中方格又分成25个小方格，共400小格；另一种是一个大方格分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格，总共也是400小格。我们数的是每个小格中的细胞数，要算一个大格中的细胞数，一个大格中有400个小格，所以要乘以400。

2、每一大格的体积为0.1cm×0.1cm×0.01cm=10-4ml。计数板计数时，最适细胞浓度为5～10×105个/ml，此范围外计数误差偏大。对于高浓度细胞悬液，可取出部分作稀释或连续稀释后计数。例如：活细胞数/方格：55，62，49，59。死细胞数/方格：5，3，4，6。细胞总数=243，平均细胞数/方格=60.75。

3、首先，设定一个测量单元，例如每个大格的体积为1mm x 1mm x 0.1mm，即0.1立方毫米（0.1mm3）。由于1毫升等于1000立方毫米（1mL = 1000mm3），在进行计算时，你需要将单位体积内的细胞数乘以10000（0.1mm3 * 10000 = 1mL）来换算成每毫升的细胞数量。

4、分为9个大方格，每个大格面积为0mm.容积为0.1mm（ul），其中，中央大方格用双线双成25个中方格，位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域，用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域，用单线划分为16个中方格。根椐国际标准局（NBS）规定，大方格每边长度允许误差为±1%。

5、如果是25个大方格组成的计数区，除数上述四个大方格外，还需数中央1个大方格的菌数（即80个小格）。为 了保证计数的准确性，避免重复计数和漏记，在计数时，对沉降在格线上的细胞的统计应有统一的规定。如菌体位于大方格的双线上，计数时则数上线不数下线，数 左线不数右线，以减少误差。