酶溶液的密度（酶溶液的密度怎么求）

酶的分离和纯化方法是什么?

酶的分离纯化一般包括三个基本步骤：即抽提、纯化、结晶或制剂。首先将所需的酶从原料中引入溶液，此时不可避免地夹带着一些杂质，然后再将此酶从溶液中选择性地分离出来，或者从此溶液中选择性地除去杂质，然后制成纯化的酶制剂。

酶分离纯化时需遵循的基本原则是维持酶的活性，避免失活，并尽量避免在极端条件下进行操作，必要时还需加入保护剂。尽管酶通常为蛋白质，但并非所有具有生物催化功能的分子都是蛋白质，有些RNA分子也被认为是核酶，同样拥有催化能力。

酶分离纯化方法是通过将酶分离提纯以获得高度纯净的酶制剂的方法。包括抽提、纯化和制剂三个环节，自1926年从刀豆中提出脲酶结晶以来，迄今已有200种左右的酶制成结晶，相当数量的酶达到高度净化。

酶的分离和纯化分为两个方面：浓缩酶制剂以减少体积，以及分离并去除酶制剂中的大量杂蛋白和其他大分子物质。判断分离纯化方法的优势需考虑总活力的回收和比活力提高的倍数。生物细胞产生的酶分为胞外酶和胞内酶。胞外酶由细胞内产生并分泌到细胞外，如水解酶；胞内酶在细胞内合成并催化反应，数量较多。

酶的分离纯化方法一般根据酶的分子量、等电点、疏水性等生化性质，选择相应的沉淀、盐析、层析方法，其中亲和层析可以应用可逆性底物作为配基或特异性抗体，制备亲和层析胶。酶的分离纯化工作主要是，将酶从杂蛋白中分离出来或者将杂蛋白从酶溶液中除去。

SOD酶的活力的测定方法如下：直接法原理是根据O2 或产生O2 的物质本身的性质测定O2 的歧化量，从而确定SOD的活性。经典的直接法包括：脉冲辐射分解法、电子顺磁共振波法（EPR）、核磁共振法。由于所需的仪器设备价格昂贵，一般较少应用。

测定方法很多，常见的有化学法、免疫法和等电点聚焦法。其中化学法应用最普遍，化学法的原理主要是利用有些化合物在自氧化过程中会产生有色中间物和O2 -，利用SOD分解而间接推算酶活力。

当被测样品中含有SOD时，则对超氧阴离子自由基有专一性的抑制作用，使形成的亚硝酸盐减少，比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值。如果用分光光度计，最好设定黑暗和照光作为对照。依据SOD能抑制氮蓝四唑（NBT）在光下的还原作用来确定酶活性大小。

1、糖化酶是一种在物理化学性质上表现出独特特性的酶。首先，它的密度在25摄氏度下大约为2克每毫升，呈现出近白色的至浅棕色的无定型粉末状态。在一些情况下，它也可能以浅棕色至深棕色的液体形式存在，这种液体能够容易地分散在食用级稀释剂或者载体中，以确保其在食品工业中的应用。

2、葡萄糖苷酶的物理化学特性表现多样。其外观形式可以是澄清的琥珀色至暗棕色的液体，或者是白色至浅棕黄色的粉末。这种酶制剂的核心成分包括α-淀粉酶和β-淀粉酶，它们在分解多糖过程中起着关键作用。

3、美国康奈尔大学的生物化学家萨姆纳从一种美洲热带植物的白色种子里分离出一些晶体，这种晶体的溶液显示出脲酶所具的性质。脲酶是一种能对尿素分解为二氧化碳和氨的反应起催化作用的酶。这种晶体还显示出蛋白质的性质，凡是能使蛋白质变性的东西，也都会破坏这种酶，由此，萨姆纳肯定酶是一种蛋白质。

4、生物材料制备曲霉在生物材料制备方面也有应用。利用其产生的酶和其他生物活性物质，可以制备出高性能的生物材料，如生物塑料、生物纤维等。这些材料具有优异的物理和化学性质，广泛应用于医疗、环保等领域。

5、酵素有凉性热性的解析。在最佳温度范围内，酶活性最强，反应速率最高。在适宜的温度范围内，每升高10℃酶促反应速度可提高1－2倍。酶在不同生物中的最适温度不同。如动物组织中各种酶的最适温度为37－40℃；微生物中各种酶的最适温度为25－60℃，但也有例外。

1、在分离的原生质体中，常常混杂有亚细胞碎片、维管束成分、未解离细胞、破碎的原生质体以及微生物等，这些混杂物的存在会对原生质体产生不良影响，此外还需去掉酶溶液，因此必须对原生质体进行纯化。常用的纯化方法有离心沉淀法、漂浮法和界面法。

2、原生质体纯化的方法是可以用密度梯度离心的，原生质体纯化是一种高强度的二氧化碳的一个结构体，所以它是可以使用密度梯度的离行。

3、原生质体纯化的方法：沉降法：最常用的方法，将过滤和离心相结合。置于离心管离心，原生质体沉于离心管底部，残液碎屑悬浮于上清液。

4、原生质体就是除去细胞壁的被细胞膜包围的“裸露细胞”甘露醇是作为维持细胞膜内外渗透压平衡的稳定剂使用的。其具体作用是提高渗透压，防止水分渗入细胞内部，造成细胞破裂。参照下图。

5、原生质体：表示植物细胞壁内的原生质，即指细胞通过质壁分离，能够和细胞壁分开的那部分细胞物质，包括细胞膜、细胞质和细胞核，换言之原生质体就是除去细胞壁的被细胞膜包围的“裸露细胞”。原生质：主要成分是糖类、蛋白质、核酸、脂质等。