细胞计数及台盼蓝染色鉴别死活细胞_百替生物
1、实验十一实验目的细胞计数及台盼蓝染色鉴别死活细胞练习使用细胞计数板进行细胞计数；掌握台盼蓝染色法进行的死活细胞鉴别。实验原理（一）细胞计数原理细胞密度（个/ml）=n/4×1000×稀释倍数n=四大格内的细胞总数1234（二）台盼蓝染色原理台盼蓝是检测死、活细胞最常用的生物染色试剂之一。
细胞计数板计算公式
计数公式为：红细胞计数=N/5×25×10×106×200。简述牛鲍计数板中不同方格的意义：牛鲍计数板的主要作用是作为显微镜计数的工具，在血细胞计数中起到至关重要的作用。计数板外观呈“H”型，有计数池，将所需要检测的标本进行充池之后需要静置一段时间，使标本处于同一平面。
．16×25的计数板计算公式：细胞数 ml=（100小格内的细胞数 100）×400×1000×稀释倍数 2．25×16的计数板计算公式：细胞数 ml=（80小格内的细胞数 80）×400×1000×稀释倍数 操作方法：1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。
细胞计数板的计算公式为：L=N×5×10。以下是关于该公式的具体解释：L：代表细胞计数板中细胞的总数量或者密度，具体含义可能根据实验目的和上下文有所不同。N：表示在细胞计数板的特定区域内观察到的细胞数量。这个区域通常是计数板上的一个固定区域，用于标准化计数过程。
超详细细胞计数步骤
细胞计数的超详细步骤如下：准备阶段：清洁计数板和盖玻片：使用酒精擦拭计数池和盖玻片，确保表面干净无杂质。分散细胞：轻轻分散细胞悬液，避免细胞聚集。上样阶段：吸取细胞悬液：使用微量移液器吸取10微升的细胞悬液。均匀涂抹：将细胞悬液均匀涂抹在计数板的网格上。
操作步骤详解 在计数前，务必用酒精擦拭计数池和盖玻片，去除任何杂质。接下来，轻轻分散细胞，用微量移液器吸取10微升悬液，确保均匀涂抹在网格上。待细胞静置，选择合适的物镜，将计数板放入显微镜。
首先，清洁并擦拭细胞计数池和盖玻片以去除纤维、指纹或水印。其次，通过轻轻摇动细胞悬浮液，使其单个细胞分散。接着，使用微量移液器吸取10微升细胞悬浮液至上样口，使其通过毛细作用进入细胞计数池，填满网格。随后，让细胞静置，选择适当物镜，将细胞计数板置于显微镜载物台上。
细胞集落形成实验主要包括平板集落形成实验和软琼脂集落形成实验。以下是这两种实验方法的详细步骤：平板集落形成实验 前期准备：确保所有实验工具在超净工作台上消毒30分钟，包括6孔板、吸管、枪头等，以及血球计数板和基质胶。细胞准备：取出贴壁率大于90%的对数生长期细胞，经过消化离心后，重悬并计数。
进入细胞间开始细胞培养时，必须严格按照下列步骤操作：①确定所有的细胞操作用的溶液和耗材都已经消毒并检测没有问题，不确定的溶液和耗材请勿使用，除非特殊情况，不要借用别人的溶液。②确定衣服的袖口已经卷起或者白大褂的袖口已经扎紧。③确定酒精灯内的酒精量，需要的话及时进行补充。
尿液中包含的细胞和管型的数量变化可以间接反映肾脏功能。实验中需按一定比例添加防腐剂以确保样本的准确性和浓缩程度。操作步骤：精确测量尿量、比重。离心沉淀尿液。在血细胞计数盘中计数细胞和管型数量。正常值范围：12小时红细胞计数应少于50万。白细胞少于100万。透明管型数量少于5000个/12h。