好像是不行的,因为提取过DNA的细胞不会再生长 。首先,严格地说,它不是DNA的降解,而是DNA中断后形成的片段,因为通常DNA很长,在操作过程中很容易被外力破坏形成碎片,这是正常现象,这在提取中是无法避免的,只能尽可能减少,如果降解,将形成分散的条带,条带差异不明显, 操作时注意轻柔。
这时候我们成功采取出基因,但是想要把提取出来的DNA放回细胞的体内这个难度就很大了,毕竟基因实在是太小了,我们要用很高的显微镜才可以看到,想要放回去,真的可能也就是用很高精度的机械搭配强大的人工智能才能做到了,这一点大家可以借鉴一下最新研究的帮助手术的机械人来看。
首先,病毒外壳上的蛋白识别细胞表面的受体,病毒吸附在细胞表面,与细胞膜融合后,病毒将衣壳留在外面,将DNA或者RNA注入到细胞内。之后,在细胞蛋白和病毒自身蛋白的帮助下,整合酶将DNA或者由RNA反转录得到的DNA整合到细胞的染色体上,过程涉及到很多蛋白。
主要方法:【1】导入植物受体细胞:(1)农杆菌转化法。农杆菌是土壤中的一种微生物,在自然条件下感染双子叶植物和裸子植物,对大多数单子叶植物没有感染能力.农杆菌进入植物细胞后,其Ti质粒上的T-DNA会转移到受体细胞染色体的DNA上,是目的基因进入植物细胞。
而蛋白质却存在于细胞质中,像DNA这样的大分子是无法随意进入细胞质的。然而密码总是会被带入细胞质的,这一来,人们不禁要问,是谁把锁在细胞核内的DNA手里的密码带入了细胞质的呢?科学家们从DNA那里拷贝了一份密码文件,并带入了细胞质中。经过试验和观察,发现这个信使就是RNA——核糖核酸。
染色质免疫共沉淀技术是在保持组蛋白和DNA联合的同时,通过运用对应于一个特定组蛋白标记的生物抗体,染色质被切成很小的片断,并沉淀下来的技术。这项技术主要用来分析目标基因有没有活性、或者分析一种已知蛋白(转录因子)的靶基因有哪些。
【答案】: 染色质免疫共沉淀技术(ChromatinImmunoprecipitation,ChIP)也称结合位点分析法,是研究体内蛋白质与DNA相互作用的有力工具,通常用于转录因子结合位点或组蛋白特异性修饰位点的研究。
染色质免疫共沉淀技术(ChIP)是研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用的关键途径,揭示真核生物基因表达机制。这一技术在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,将其随机切断为一定长度的染色质片段,通过免疫学方法沉淀复合体,实现对特定蛋白结合的DNA片段的富集。
朋友你好!如果用293T细胞那么12孔板一个孔的细胞量就够,但293T属于细胞个体小且长得比较密比较多的那种,如果换做HeLa或者更大更稀的其他细胞,那还是6孔板或者35mm小皿更保险。
在进行rtpcr时,对于rna的浓度和纯度要求,通常浓度在20ng/ul以上即可满足实验需求。如果样本来源于组织,其浓度可能会非常高,达到几百甚至几千。然而,对于病毒或少量细胞,所需的浓度会相对较低。为了确保rna的纯度,必须使用仪器进行测量。
rtpcr时提取rna的浓度和纯度要求:浓度20ng/ul以上足够了,如果用的是组织提取,浓度一般很高,可以达到几百甚至几千。如果你用的是病毒、少量细胞,浓度低一些也没有关系。纯度需要用仪器测一下。260/280理论值应该有0以上,260/230值2以上基本合格。
rtpcr操作有5个步骤。具体操作如下:总RNA提取。DEPC处理水溶解RNA,-20℃保存,备反转录之用。反转录。
1、提取RNA的方法很多,在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。前者利用稀碱溶解细胞壁,使RNA释放出来,这种方法提取时间短,但RNA在此条件下不稳定,容易分解;后者在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的透性,使RNA释放出来,此法易掌握,产品颜色较好。
2、提取方法多样,有手工和自动化两种。煮沸裂解法适用于DNA粗提取,但效果一般。
3、提取原理和方法:细胞裂解释放核酸,核酸沉淀则分离纯化。传统方法如煮沸裂解、磁珠法、酚氯仿抽提等各有特点,适合不同类型的核酸和样本类型。 纯化策略:包括煮沸裂解法、磁珠法、阴离子去污剂法等,每种方法针对特定的DNA或RNA结构和样本特性设计,确保完整性和纯度。
4、常见的核酸提取方法包括手工和自动化提取,以及基于煮沸裂解法、酚氯仿抽提、浓盐法、阴离子去污剂法、Trizol法、CTAB法、离心柱纯化和磁珠法等。
5、核酸是生物体内的遗传物质,包括DNA和RNA。DNA主要存在于细胞核、线粒体和叶绿体,RNA则在细胞质中。提取核酸对生物研究至关重要,直接影响实验结果。提取纯化原则与要求 核酸提取步骤主要包括破碎、溶解、沉淀、洗涤和纯化。需确保提取的核酸纯度高、片段完整,以满足实验需求。
6、dna的提取方法:浓盐法、SDS法、CTAB法等。 浓盐法。根据DNA和RNA在电解溶液中的溶解度不同,可将二者分离。常用1 mol/L NaCl抽提,得到的DNP黏液中加入含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使之乳化,再离心,使蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA则位于上层水相中。