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7-add染料在流式细胞仪哪个通道检测

1、如上所述，流式细胞仪是由液流系统、光路系统以及检测分析系统三部分组成，部分仪器还具有分选功能，能对粒子进行充电和偏转从而实现细胞分选。

2、第二个峰是正常的肝细胞。 比如下面这个图，是正常细胞的1，做的是肝癌患者活检后的检查，比如PI染色。第三个峰是DNA含量多于正常细胞（也就是癌细胞流式细胞仪测DNA含量具体步骤怎么调流式检测DNA含量，是通过DNA荧光染料，然后和已知DNA含量的商品化标准品（比如鸡红细胞）比对，得到含量。

3、在流式实验中，我遇到的第四大挑战是染料污染问题的处理。具体案例中，即使是培养的无荧光标记的细胞，也在CytoFLEX流式细胞仪的FITC、PE和PC5通道上出现了意想不到的阳性信号，且荧光信号随着时间变化而偏离正常。首先，细胞污染、自身表达荧光蛋白或药物处理等因素可能导致阳性反应。

激发波长在488nm的电泳荧光染料有哪些

1、考马斯亮蓝g-250（coomassie brilliant blue g-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝g-250在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。

2、选用荧光素异硫氰酸酯（FITC）为衍生化试剂，当缓冲溶液为25 mmol/L Na2B4O7（pH 2）、分离电压25 kV、柱温20 ℃、电动进样（10 kV×8 s）、以峰面积内标法定量、于激发波长/发射波长= 488/520 nm柱上检测时，富马酸比索洛尔得到较好分离。

3、而 PI染料能够与细胞内的DNA结合 ， 区分坏死细胞和活细胞 。

4、然而，在488 nm 激光或类似可见光下GelRed 不能被充分地激发，如果需要，建议您使用GelGreen染色剂，其灵敏度与SYBR Green I一样，但其稳定性和可靠性远胜于后者。通常后染比前染能够获得更灵敏的特性，并能排除染色剂在电泳过程中对核酸条带分离造成任何影响的可能性。

5、完成孵育后，立即进行流式细胞分析。采用488 nm双波长激发，测定~510 nm和575 nm的发射，细胞应可分成三个亚群：活细胞仅有很低的荧光强度，凋亡细胞有较强的绿色荧光，坏死细胞（包括极晚期凋亡细胞）有绿色和红色荧光双重染色。

常见的荧光染料有哪些

常见的荧光染料有： 荧光素染料：荧光素染料是最常见的一类荧光染料，广泛用于生物学和医学研究。这类染料可以与生物分子结合，通过荧光显微镜观察细胞内的结构和过程。 罗丹明染料：罗丹明染料是一种较为鲜艳的荧光染料，其发射波长通常在可见光谱的红色至近红外区域。

常用的荧光染料有荧光绿B（EGFP）、荧光红（DsRed）、荧光黄（YFP）、荧光紫（CFP）、荧光橙（CFTR）等。资料扩展：荧光染料是指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。荧光染料可以单独使用，也可以组合成复合荧光染料使用。

异硫氰酸荧光素（FITC） 是一种有机荧光染料，发射波长为520 nm的荧光染料，是目前最常用的荧光标志物；它的激发波长接近488 nm，光量子得率高，但受pH影响较大。目前，这种荧光染料仍用于免疫荧光和流式细胞术中。

荧光剂的化学名称是荧光增白剂。这是一种荧光染料（白色染料），也是一种复杂的有机化合物，又称光学增白剂、荧光增白剂。它的特性是能吸收入射光线产生荧光，使所染物质获得类似荧石的闪闪发光的效应，使肉眼看到的物质很白，达到增白的效果。

发射波长：ROX 参考染料的发射波长为 610 nm 左右，而 Dye2 根据具体染料的类型，发射波长会有所不同。例如，FAM 的发射波长约为 518 nm，TAMRA 的发射波长约为 580 nm。适用范围：ROX 通常用作荧光信号的参考，可以帮助校正 PCR 仪器中的荧光偏差，从而提高定量结果的准确性。

有机荧光染料 有机荧光染料是一类常用的荧光标记物，包括荧光素、罗丹明等。它们具有较高的荧光量子产率和光稳定性，适用于多种生物分子的标记。无机荧光纳米材料 无机荧光纳米材料，如量子点，具有独特的光学性质，包括宽激发光谱、窄发射光谱和高的光稳定性。

cy5激发波长和发射波长

1、CY5激发光波长：646nm左右发射光波长：664nm左右。cy5受激发后肉眼可见仍然是红光，这是因为肉眼对波谱的分辨率是比较粗的，虽然cy5受激发后的发射波长在600以上，而人肉眼可见的波谱范围在400-700nm，从波长由高到低排列是常说的红橙黄绿蓝紫，这个红，和橙很多时候其实很很难区分开的。

2、CY5的激发波长通常在650纳米左右，这意味着当用650纳米波长的激光照射到CY5上时，它会吸收光能并产生荧光。而CY5的发射波长则在670纳米左右，也就是说，当CY5吸收光能后，会发出在670纳米左右的荧光信号。这种激发和发射波长的特性使得CY5在生物学研究中应用广泛。

3、cy5受激发后肉眼可见仍然是红光，发射波长在700nm。

用流式细胞仪检测各个象限的意义

左上象限为坏死细胞，左下象限为正常细胞，右上象限为早期凋亡细胞，右下象限为晚期凋亡细胞。

分别代表CD4阳性，CD8阳性，双阳性，和无染色的。正常情况下，是不应该有双阳性和未染色的，也就是说你的细胞应该只显示在4个象限的其中的两个。其他的两个最多只是一些背景的杂信号。代表T细胞的两个亚群。

需要在散点图上先画出4个象限，位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂，在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧，细胞发生凋亡早期，膜磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。

二维点图以双参数显示结果，每个点表示一个或多个细胞。图5-6为阴性对照图，用于设定阴性对照边界，全图划分为四个象限，以区分阴性细胞、单阳性细胞以及双阳性细胞。

荧光染料保质期

1、Cy5 CAS：146368-11-8是各种花菁染料及其衍生物，常被应用于生物分子标记，荧光成像及其他荧光生物分析。它们广泛用于标记多肽、蛋白质和核酸等。花菁染料与蛋白质结合荧光增强。储存条件：在低于-15℃温度下冷冻保存，要求储存环境干燥并避免光照。产品有效期为12个月。

2、荧光笔形状较粗，看起来很漂亮，正面没有标注，但背面内容很多。保质期为2年，生产日期是今年4月，因此还很新鲜。上面写着不适合3岁及以下儿童使用，可能是出于安全考虑。荧光笔大部分形状相似，没有特别之处，只是孩子们平时玩玩而已。学生购买荧光笔不是决定性的，但在标记重点知识上荧光笔确实很有用。

3、产品的保质期原则上是按出厂时间开始计算，但如电池这样的消费品是按消费者购买使用之日起开始计算质保期的 渗透检测方法是在测试材料表面使用一种液态染料，利用液体的毛细管作用，将渗透液渗入固体材料表面开口缺陷处。再通过显像剂将渗入的渗透液析出到表面显示缺陷的存在。而这种液态染料，被称为渗透液。

cy5染料

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